PCR، يا پوليميرس زنجير ردعمل، هڪ ٽيڪنڪ آهي جيڪو ڊي اين جي ترتيبن کي وڌائڻ لاء استعمال ڪيو ويندو آهي.اهو پهريون ڀيرو 1980 جي ڏهاڪي ۾ ڪيري موليس پاران تيار ڪيو ويو، جنهن کي هن جي ڪم لاء 1993 ۾ ڪيمسٽري ۾ نوبل انعام سان نوازيو ويو.PCR ماليڪيولر بايولوجي ۾ انقلاب آڻي ڇڏيو آهي، محققن کي ان قابل بڻائي ٿو ته هو ننڍڙن نمونن مان ڊي اين اي کي وڌائين ۽ ان جو تفصيل سان مطالعو ڪن.
پي سي آر هڪ ٽي مرحلو عمل آهي جيڪو حرارتي سائيڪلر ۾ ٿئي ٿو، هڪ مشين جيڪا تيزيء سان رد عمل جي مرکب جي درجه حرارت کي تبديل ڪري سگهي ٿي.ٽي مرحلا denaturation، annealing، ۽ extension آهن.
پهرين مرحلي ۾، ڊينيچريشن، ڊبل اسٽرينڊ ڊي اين اي کي تيز گرمي پد (عام طور تي تقريباً 95 ° سي) تي گرم ڪيو ويندو آهي ته جيئن هائيڊروجن بانڊن کي ٽوڙيو وڃي جيڪي ٻن تارن کي گڏ رکن ٿا.ان جي نتيجي ۾ ٻه سنگل اسٽرينڊ ڊي اين اي ماليڪيولز پيدا ٿين ٿا.
ٻئي مرحلي ۾، annealing، گرمي پد 55 ° C تائين گھٽجي ويندي آهي ته جيئن پرائمر کي هڪل-اسٽرينڊ ڊي اين اي تي مڪمل طور تي ترتيب ڏيڻ جي اجازت ڏني وڃي.پرائمر ڊي اين اي جا ننڍا ٽڪرا آهن جيڪي ڊي اين اي جي حدف تي دلچسپي جي ترتيب سان ملائڻ لاء ٺهيل آهن.
ٽئين مرحلي ۾، توسيع، گرمي پد کي 72 ° C تائين وڌايو ويندو آهي ته جيئن Taq پوليمريس (هڪ قسم جي ڊي اين اي پوليمريس) کي پرائمر مان ڊي اين اي جي نئين اسٽريڊ کي گڏ ڪرڻ جي اجازت ڏني وڃي.Taq پوليميرس هڪ بيڪٽيريا مان نڪتل آهي جيڪو گرم چشمن ۾ رهندو آهي ۽ PCR ۾ استعمال ٿيندڙ تيز گرمي کي برداشت ڪرڻ جي قابل آهي.
PCR جي ھڪڙي چڪر کان پوء، نتيجو ھدف ڊي اين اي جي ترتيب جا ٻه نقل آھن.ڪيترن ئي چڪرن لاءِ ٽن مرحلن کي ورجائڻ سان (عام طور تي 30-40)، ٽارگيٽ ڊي اين اي جي ترتيب جي نقلن جو تعداد تيزيءَ سان وڌائي سگھجي ٿو.هن جو مطلب اهو آهي ته شروعاتي ڊي اين اي جي هڪ ننڍڙي مقدار کي لکين يا اربين ڪاپيون پيدا ڪرڻ لاء وڌايو وڃي ٿو.
پي سي آر تحقيق ۽ تشخيص ۾ ڪيترائي ايپليڪيشنون آهن.اهو جينياتيات ۾ استعمال ڪيو ويندو آهي جين ۽ ميوٽيشنز جي ڪم جو مطالعو ڪرڻ لاءِ، فارنزڪس ۾ ڊي اين اي ثبوتن جو تجزيو ڪرڻ لاءِ، وبائي مرض جي تشخيص ۾ پيٿوجنز جي موجودگي کي معلوم ڪرڻ لاءِ، ۽ پيدائش کان اڳ جي تشخيص ۾ جنين ۾ جينياتي خرابين جي اسڪريننگ ڪرڻ لاءِ.
پي سي آر کي ڪيترن ئي تبديلين ۾ استعمال ڪرڻ لاءِ به ترتيب ڏنو ويو آهي، جهڙوڪ مقداري پي سي آر (qPCR)، جيڪو ڊي اين اي جي مقدار کي ماپڻ جي اجازت ڏئي ٿو ۽ ريورس ٽرانسڪرپشن پي سي آر (RT-PCR)، جيڪو آر اين اي جي ترتيبن کي وڌائڻ لاءِ استعمال ڪري سگهجي ٿو.
ان جي ڪيترن ئي ايپليڪيشنن جي باوجود، پي سي آر جون حدون آهن.ان لاءِ ھدف جي ترتيب جي ڄاڻ ۽ مناسب پرائمر جي ڊيزائن جي ضرورت آھي، ۽ جيڪڏھن رد عمل جون حالتون صحيح طرح سان بهتر نه ڪيون ويون آھن ته ان ۾ غلطي ٿي سگھي ٿي.بهرحال، محتاط تجرباتي ڊيزائن ۽ عمل سان، PCR ماليڪيولر بائيولاجي ۾ سڀ کان وڌيڪ طاقتور اوزارن مان هڪ آهي.
پوسٽ جو وقت: فيبروري-22-2023